Ingénieur en techniques biologiques moléculaires F/H

Vous travaillerez sous la responsabilité directe du Dr. Gautier FOLLAIN et interagirez régulièrement avec le co-directeur de l'équipe, Prof. BERNHARD, localisé au CHU Pellegrin.
Votre mission consistera à contribuer à la réalisation expérimentale des projets de recherche de l'équipe en mettant en œuvre, adaptant et optimisant des approches de biologie moléculaire et de génie génétique. Vous serez également en charge de développer et appliquer des stratégies de construction, modification et caractérisation de vecteurs et de systèmes biologiques, en lien avec les problématiques de recherche de l'équipe.
# Biologie moléculaire
• Vous concevez et réalisez des travaux de biologie moléculaire permettant la modification de cellules eucaryotes, principalement cancéreuses rénales en utilisant des outils de conception et d'analyse moléculaire, notamment SnapGene et BLAST
• Vous mettez en œuvre des stratégies d'ingénierie des plasmides, notamment par PCR de clonage, digestion enzymatique, d'assemblage de type Golden Gate ou Gateway
• Vous préparez et purifiez des acides nucléiques, notamment ADN génomique et plasmidique, ARN et protéines et assurez leur contrôle qualité
• Vous réalisez des transformations bactériennes et des transfections de lignées cellulaires mammaliennes
• Vous effectuez des modifications génétiques par édition du génome, notamment à l'aide de la technologie CRISPR-Cas9
• Vous mettez en œuvre des systèmes d'expression permettant la production de protéines en large quantité
• Vous menez des analyses de protéines : dosage protéique, Western blot, ainsi que des dosages de type ELISA
• Vous assurez la culture et la maintenance de modèles cellulaires microbiens en conditions adhérentes ou en suspension
# Biologie cellulaire
• Vous cultivez et optimisez des lignées cellulaires tumorales et des cellules primaires
• Vous participez à la mise au point et à l'optimisation de tests fonctionnels et de toxicité sur modèles cellulaires
• Vous réalisez et/ou contribuez à des acquisitions et analyses d'imagerie en microscopie à fluorescence et sur systèmes automatisés
• Vous exécutez des techniques d'immunohistochimie et d'immunofluorescence, incluant la préparation des échantillons, l'inclusion en paraffine, la coupe au microtome et l'analyse d'images
# Analyse et communication des résultats
• Vous analysez, mettez en forme et présentez les résultats expérimentaux à l'aide d'outils adaptés, notamment Excel, GraphPad Prism et Fiji
• Vous documentez les protocoles, assurez la traçabilité des constructions et expériences et contribuez à la transmission des savoir-faire au sein de l'équipe